PCR技術(shù)誕生至今,隨著(zhù)生命科學(xué)領(lǐng)域以及延伸領(lǐng)域的應用需求,PCR技術(shù)已經(jīng)經(jīng)過(guò)了三代突破性的更迭,使其應用范圍越來(lái)越廣泛。下面就給大家介紹關(guān)于PCR技術(shù)的原理以及用途的內容,歡迎閱讀!
PCR技術(shù)的原理:
聚合酶鏈式反應,Polymerase Chain Reaction (PCR),簡(jiǎn)單來(lái)講,其就是利用DNA分子會(huì )在體外95°高溫時(shí)會(huì )發(fā)生變性解旋變成單鏈,然后降溫到60°C左右時(shí)引物會(huì )與單鏈DNA按堿基互補配對原則結合,接著(zhù)再升高溫度到72°C左右,即DNA聚合酶適合反應溫度,DNA聚合酶會(huì )沿著(zhù)磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成相應的互補鏈,如此循環(huán)往復以達到DNA分子擴增的目的。
PCR技術(shù)的主要用途:
1.核酸基礎研究:基因組克隆。
2.DNA測序采用不對稱(chēng)PCR制備單鏈DNA。
3.反向PCR測定未知DNA區域。
4.反轉錄PCR(RT-PCR)用于檢測細胞中的基因表達水平、RNA病毒量和直接克隆特定基因的CDNA。
5.熒光定量PCR用于實(shí)時(shí)監控PCR產(chǎn)品。
6.CDNA終端快速擴增技術(shù)。
7.檢測基因的表達。
8.醫學(xué)應用:檢測細菌疾病的檢測;遺傳病的診斷;腫瘤的診斷;用于法醫物證。
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